色譜條件法

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色譜條件法

色譜柱的選擇

色譜柱主要選擇固定相和柱長。

固定相選擇需注意兩個方面:極性及最高使用温度。按相似性原則和混合物主要差別選擇固定相。柱温不能超過最高使用温度。在分析高沸點化合物時,需選擇高温固定相。氣-液色譜法還要注意載體的選擇。高沸點樣品用比表面積小的載體、低固定液配比(1%~3%),以防保留時間過長,峯擴張嚴重此外,低配比時可使用較低柱温。低沸點樣品宜使用高配比(5%~25%),從而增大柱的容量因子,以達到良好分離。難分離樣品可用毛細管柱。

柱長加長能增加塔板數n,使分離度提高。但柱長過長,縱向擴散係數增大,峯變寬,柱阻也增加,並不利於分離。

在不改變塔板高度(H)的條件下,分離度與柱長有如下關係:

(R1/R2)2=L1/L2

2、

柱温的選擇

柱温對分離度影響很大,經常是條件選擇的關鍵。選擇的基本原則是:在使最難分離的組分有符合要求的分離度的前提下,儘可能採用較低柱温,但以保留時間適宜及不拖尾為度。

低柱温可增大分配係數,增加選擇性,降低組分在載氣中的擴散係數,減少固定液流失,延長柱壽命及降低檢測本底。但柱温降低,液相傳質阻抗增加而使峯擴張,太低則拖尾,故以不拖尾為度。可根據樣品沸點來選擇柱温。

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