pcr熒光閾值的定義及設置原則

熒光定量PCR原理是在PCR擴增過程中，加入熒光標記探針或相應的熒光染料，通過監測熒光信號對PCR產物量實時監測，所以也稱它為Real-timePCR。熒光信號就是PCR的“七彩靚衣”PCR温度（℃）947260循環194℃變性72℃60℃延伸退火循環2循環3……時間（分鐘）熒光信號熒光基團激發光發射光--在PCR反應體系中加入熒光染料或熒光標記探針。

--熒光基團在激發光的作用下，產生波長更長的發射光。

--利用熒光信號的變化動態監測整個反應過程。

➢擴增曲線基線期指數增長期平台期Rn（熒光強度）指數增長期基線期平台期Cycle（循環數）。

熒光定量 PCR（Real-time PCR），是指在 PCR 擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測，最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

對照的目的是對檢測的各個環節進行監控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。常規熒光定量 PCR 的流程是：樣品採集 - 運輸 - 樣品處理 - 核酸提取 - 反轉錄（RNA 病毒）- 擴增 - 結果讀取。