革蘭氏染色最重要的一步為什麼
脱色。
乙醇脱色是革蘭氏染色操作的關鍵環節：脱色不足，陰性菌被誤染成陽性菌脱色過度，陽性菌被誤染成陰性菌。
因而脱色時間一般為20-30s。革蘭氏染色法，是指細菌學中廣泛使用的一種重要的鑑別染色法，屬於復染法。
這種染色法是由丹麥醫生革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷伯肺炎菌。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脱色、復染等四個步驟。
染色原理：通過初染和媒染後，細胞內形成了不溶於水的結晶紫一碘大分子複合物。
革蘭氏陽性細菌由於細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和其分子交聯度較緊密，故在用乙醇洗脱時，肽聚糖網孔會因脱水而明顯收縮，加上它基本不含類脂，故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙。
因此，結晶紫與碘複合物仍牢牢阻留在細胞壁內，使其呈現紫色。而革蘭氏陰性細菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交聯鬆散，故遇乙醇後，肽聚糖網孔不易收縮，加上它類脂含量高，所以當乙醇把類脂溶解後，在細胞壁上就會出現較大縫隙，複合物容易溶出細胞壁，因此通過乙醇脱色後，細胞又成無色。
這時再用紅色染料進行復染，革蘭氏陰性細菌將獲得一層新的顏色——紅色，而革蘭氏陽性菌則仍呈紫色。
革蘭氏染色最重要的一步為什麼
革蘭氏染色關鍵步驟是脱色。因為在染色時，乙醇脱色是革蘭氏染色操作的關鍵環節，脱色不足，陰性菌被誤染成陽性菌，脱色過度，陽性菌被誤染成陰性菌，脱色時間為20~30s。革蘭氏染色（Gram Staining）是用來鑑別細菌的一種方法：這種染色法利用細菌細胞壁上的生物化學性質不同，可將細菌分成兩類，即革蘭氏陽性（Gram Positive）與革蘭氏陰性（Gram Negative）。這一染色方法由丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭於1884年所發明，最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係，後推廣為鑑別細菌種類的重要特性之一，對由細菌感染引起的疾病的臨牀診斷及治療有着廣泛用途。
