原生質體轉化不成功原因

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原生質體轉化不成功原因

1、 酶解 30 min-1 h 鏡檢原生質體活率低。首先要檢查酶解液的 PH 是否低於 5.5,酶解液 PH 較低會影響原生質體狀態其次檢查酶解過程中是否進行了避光措施,不採取避光措施會對原生質體質膜造成傷害從而導致活性降低。

2、 酶解時間超過某一時間後活率出現下降,這種情況是因為酶解時間過長導致的原生質體活率下降。

原生質體得率低最大可能是酶解液未能很好的接觸切口,比如水稻葉片組織,本身不易浸入酶解液中,可以通過真空泵輔助的方法使酶解液進入組織內部,從而提高原生質體得率還有可能是原生質體沒能很好的從切口處遊離出去,可以使用更高轉速的搖牀來輔助原生質體釋放,或者通過對酶解後組織的輕微擠壓來幫助原生質體釋放。

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